Reagente de detecção de PCR em tempo real para Vibrio cholerae O1/O139 LyoDt® liofilizado - Não é necessária cadeia de frio e pré-dispensado um único teste

LyoDt^®PCR em tempo real liofilizada Reagente de detecção para Vibrio choleraeO1/O139

Utilização- Não.Manual

1.Descrição

Vibrio choleraeé uma bactéria Gram- negativa que causa a cólera, uma doença infecciosa intestinal aguda caracterizada por início rápido, elevada transmissão e mortalidade significativa.Como doença sujeita a quarentena nos termos dos regulamentos sanitários internacionais, inclui principalmente os sorogrupos O1 e O139. 

Este produto é um reagente de PCR em tempo real liofilizadopara o detecção deVibrio choleraeO1/O139. Ele usa o altamente conservado Rfb género deVibrio choleraeO1/O139 como alvo de detecção. Trata-se de um mastermix que contém todos os ingredientes necessários, exceto o ADN modelo, e é pré-dispensado como um único teste em tubos de PCR para facilitar o uso.Este produto não requer cadeia de frio para transporte e armazenamento, o que reduz significativamente os custos de transporte e elimina eventuais perdas por desperdício de reagente e contaminação por aerossóis.

2. Especificações e composição

3. armazenamento Duração de validade

Armazenamentoà temperatura ambiente (5 a 30)°C). É estável por até 12 meses. Uma vez aberta a embalagem a vácuo, conserve os produtos não utilizados no saco plástico recolocável fornecido com os dessecantes,eno saco de alumínio. 

ATENÇÃO: 

A diminuição da dimensão do grão de reagente indica a entrada de umidade no tubo e a umedecimento do reagente.Todos os reagentes com uma granulação significativamente menor do que o habitual devem ser descartados ou testados com controlo positivo antes da utilização. para ensaios de amostras.

4- EQUIPAMENTOS e reagentes adicionais necessários

1)Instrumento de PCR em tempo real

2)Pip- Não.e gorjetas

3)Nuclease-água livre

4)Kit de extracção de ácido nucleico

5. SISTEMAS de PCR em tempo real compatíveis

ABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6Espécimes aceitáveis

Caldo de enriquecimento de alimentos, etc.

7. PROCEDIMENTO DE OPERAÇÃO

1)NuclearACIDEextração

ExtractoDNAde amostras com um kit de extracção adequado.Recomenda- se que oDNAé elutado com cerca de 100 μl de tampão de elução(TE ouH livre de nuclease₂O)na fase final deextração.O ácido nucleico purificado deve ser utilizado imediatamente ou armazenado a - 20°C.

2)Preparação do controlo positivo

O controlo positivo pode ser armazenado à temperatura ambiente antes da reidratação até 12 meses.É.deve ser reidratado antes da utilizaçãoadicionando250μlde amortecimento TE ou nsem escleroseH₂O,utilizar imediatamente ou conservarem -20°C.

3)PCR em tempo realMIXPreparação

A) Abrir a embalagem a vácuo e retirar a fita de 8 tubossVerifique se o pellete está no fundo do tubo. (Cortar o número de tubos conforme necessário senecessária)Se os tubos fornecidos não forem compatíveis com o seu instrumento, transfira o reagente para um tubo óptico compatível com o seu instrumento.

B) Abrir os tubos e descartar as tampas (não adequadas para máquinas de PCR em tempo real) e preparar a mistura de reação no gelo como se segue.

* Pode ser utilizada água sem nuclease como controlo negativo.

C)A PCR deve ser revestida com tampas (listas) adequadas para a PCR em tempo real.(não fornecido).

D) Vortex os tubos a baixa velocidade durante 10 ~ 15sec, e centrifugar a 3000rpm durante 20sec e colocá-los em um instrumento de PCR em tempo real.

4)Configuração RT-PCR

Defina o volume de reação em 25μl e o procedimento de amplificação por PCR como se segue.(paraO1),Joe.(paraO139)  fluorescência a 60°C, e selecionar NÃO como referência passiva.

5)ResultadoAanáliseeEu...Interpretação