Jogo ácido nucleico infeccioso da detecção do jogo IMNV da amplificação do ADN do vírus da mionecrose

Jogos ácidos nucleicos da detecção do vírus infeccioso da mionecrose

(Método PCR-fluorescente da ponta de prova)

 
Uso pretendido:

Este jogo é apropriado para o diagnóstico do vírus infeccioso da mionecrose (IMNV).

Princípio:

Este jogo usa o RNA como um molde e as primeiras demão como um ponto de partida para sintetizar as costas do cDNA complementares ao molde do RNA sob a ação do transcriptase reverso de grande eficacia. Escolha a ponta de prova específica do projeto conservador do gene do vírus do pêssego, a ponta de prova pode com área da amplificação da primeira demão no meio de um molde obrigatório específico do ADN, em processo da extensão do PCR, as enzimas limitadas da polimerase de Taq do 5" extremidade de grupos fluorescentes na ponta de prova será reduzido, feito livre no sistema de reação, extinguindo desse modo grupos fora do 3" extremidade, fulgor, o ácido nucleico do vírus do taora foi detectado pelo PCR da fluorescência em um sistema de reação completamente fechado.

Componentes principais:
 

 
Exigências da amostra:
 

1. Tipo da amostra

Camarão comestível, camarão machijiming, vannamei e outros tecidos susceptíveis do camarão

2. Coleção da amostra

Sobre amostras de tecido 0.1g foram tomados das amostras do camarão de acordo com tamanhos ou fases diferentes da infecção. Entre eles, os indivíduos inteiros foram tomados das larvas e as larvas, a cabeça e a caixa dos olhos foram removidas dos juvenis abaixo 3CM, a área da brânquia foi tomada dos juvenis maiores, e os filamentos da brânquia ou o coração ou os órgãos linfáticos foram tomados do camarão adulto.

3. Armazenamento e transporte

As amostras são transportadas em sacos de gelo de 2℃~8℃, e repetiram a congelação e thawing são proibidos. O armazenamento a curto prazo em -20℃, -70℃ pode ser armazenamento a longo prazo.

 
Usando Micgene 242/244/244IVD e ABI QuantStudio 5:
 
os procedimentos são ajustados como abaixo:

FAM foi selecionado para o canal da detecção.

Os resultados da interpretação

Nota: O resultado é julgado para ser a área cinzenta, que precisa de ser verificada novamente. Se verifique novamente o resultado é valor do Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">  
Análise do resultado:
Análise automática usando a instrumentação
 
Controle da qualidade:
Controle negativo: Nenhuma curva óbvia da amplificação do canal da detecção de FAM;
Controle positivo: O canal de FAM mostrou a curva óbvia da amplificação, valor ≤30 do Ct;
 
As circunstâncias acima são estadas conformes simultaneamente na mesma experiência; de outra maneira, a experiência é inválida e reexaminar é exigido.
 
Os detalhes da operação satisfazem verificam de IFU!